【摘要】 潔凈室（Clean Room）是醫(yī)學(xué)院校教學(xué)和科研必備的實(shí)驗(yàn)條件之一， 正確使用潔凈室是保證實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性的前提， 針對高校老師及研究生在使用潔凈室過程中存在的不足， 本文從概念、要求、監(jiān)測方法、注意事項(xiàng)等幾個(gè)方面全面闡述了如何正確使用潔凈室。 

　在醫(yī)學(xué)院校不管是教學(xué)還是科研工作潔凈室是必備的實(shí)驗(yàn)條件之一。其中實(shí)驗(yàn)教師以及研究生更是使用潔凈室的主力軍， 但在教學(xué)過程中發(fā)現(xiàn)， 很多教師和研究生對如何正確使用潔凈室還存在很多誤區(qū)， 本文將從潔凈室的概念、要求、監(jiān)測方法、使用注意點(diǎn)幾個(gè)方面綜合闡述如何正確使用潔凈室。 

　　1 什么是潔凈室 
　　首先高校師生對潔凈室的概念存在誤區(qū)， 大部分師生都稱之為無菌室， 事實(shí)上絕對無菌的空間是很難獲得的， 更專業(yè)的稱呼如題名應(yīng)該叫 “潔凈室”[1]。那什么樣的空間可以稱之為“潔凈室”呢？以下從概念、狀態(tài)、氣流形式、分級幾個(gè)方面來闡述。同時(shí)引申一個(gè)問題， 潔凈到什么樣的程度才可以符合實(shí)驗(yàn)要求？ 
　　概念：對塵粒及微生物污染規(guī)定需進(jìn)行環(huán)境控制的房間和區(qū)域， 其建筑結(jié)構(gòu)、裝備及其使用均具有減少對該區(qū)域污染的介入、產(chǎn)生和滯留的功能[2]。其他相關(guān)參數(shù)如溫度、濕度、壓力也有必要控制。 
　　狀態(tài)：靜態(tài) （at-rest）指凈化空氣調(diào)節(jié)系統(tǒng)已安裝完畢且功能完備的情況下， 潔凈室內(nèi)工作人員撤離現(xiàn)場并經(jīng)過20 min自凈后的狀態(tài)。動(dòng)態(tài)（operational）指潔凈室處于正常工作狀態(tài)， 設(shè)備正常運(yùn)行， 并且有指定的人員按照規(guī)范操作。對于高校師生來講更應(yīng)該關(guān)注動(dòng)態(tài)的監(jiān)測結(jié)果。 
　　氣流形式：單向流（unidirectional airflow）：沿單一方向呈平行流線并且與氣流方向垂直的斷面上風(fēng)速均勻的氣流。與水平面垂直的叫垂直單向流（vertical unidirectional airflow）， 與水平面平行的叫水平單向流（horizontal unidirectional airflow）。非單向流（non-unidirectional airflow）：具有多個(gè)通路循環(huán)特性或氣流方向不平行的氣流。高校實(shí)驗(yàn)用潔凈室由于面積比較小， 一般都是垂直單向流設(shè)計(jì)的。 
　　2 潔凈室的要求 
　　潔凈室等級：潔凈度 （cleanliness）是指潔凈環(huán)境內(nèi)單位體積空氣中含大于或等于某一粒徑懸浮粒子的統(tǒng)計(jì)數(shù)量來區(qū)分的潔凈程度[3]。根據(jù)《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》（2010）規(guī)定， 分級見表1。 
　　醫(yī)學(xué)院校的潔凈室大都進(jìn)行生物實(shí)驗(yàn)， 所以還應(yīng)當(dāng)關(guān)注環(huán)境的微生物狀況。要求見表2。 
　　根據(jù)《中國藥典》（2010）規(guī)定， 無菌檢查應(yīng)在環(huán)境潔凈度 10000 級， 局部潔凈度 100 級的單向流空氣區(qū)域內(nèi)或隔離系統(tǒng)中進(jìn)行， 對于醫(yī)學(xué)院校的生物實(shí)驗(yàn)， 如無特殊規(guī)定也都按這個(gè)要求， 也就是通常所見10000級實(shí)驗(yàn)室套100級超凈臺(tái)的設(shè)計(jì)[4]。以下著重闡述高校使用率最高的10000級實(shí)驗(yàn)室套100級超凈臺(tái)的潔凈室的監(jiān)測和使用。判定10000級潔凈室及100級超凈工作臺(tái)是否有效運(yùn)行應(yīng)該分別按照表1、表2的C級和A級執(zhí)行。 
　　3 潔凈室的監(jiān)測 
　　潔凈室需要控管的項(xiàng)目包括溫度、濕度、靜壓差、風(fēng)速、微粒、浮游菌、沉降菌， 當(dāng)然在設(shè)計(jì)之初還有噪音、光照度、安全、節(jié)能等方面的考慮。對于使用者來說使用過程中學(xué)會(huì)日常監(jiān)測非常重要， 這是保證教學(xué)科研工作的前提之一， 也有利于在出現(xiàn)異常數(shù)據(jù)時(shí)排查原因。 
　　溫度、濕度、靜壓差、風(fēng)速是預(yù)測試指標(biāo)， 只有這些指標(biāo)都在規(guī)定范圍內(nèi)， 后續(xù)3個(gè)主測試指標(biāo)的監(jiān)測才有意義。溫濕度要求使用者可以自己把握， 如無特殊要求時(shí)， 溫度在18～26℃， 相對濕度在45%～65%為宜。潔凈室與非潔凈室之間的靜壓差應(yīng)>10 Pa；相鄰不同潔凈級別的潔凈室之間的壓差應(yīng)>0.5 Pa；潔凈區(qū)與室外壓差應(yīng)>12 Pa。單向流凈室實(shí)測室內(nèi)平均風(fēng)速應(yīng)大于設(shè)計(jì)風(fēng)速， 但不應(yīng)超過15%。以上測試可以通過溫濕度儀、微壓計(jì)、風(fēng)速儀來完成。 
　　懸浮粒子測試可以通過微粒計(jì)數(shù)儀來完成。監(jiān)測時(shí)首先用面積開根號的方法確定最少采樣點(diǎn)數(shù)目， 學(xué)校生物實(shí)驗(yàn)室都比較小， 一般每間3～4個(gè)點(diǎn)就夠了， 采樣時(shí)需注意采樣點(diǎn)在室內(nèi)均勻分布并盡量避開回風(fēng)口， 采樣管口應(yīng)正對氣流方向， 高度約離地80 cm， 測試人員應(yīng)在采樣口的下風(fēng)側(cè)， 并盡量減少活動(dòng)。為保證儀器下次能正常使用， 采樣完畢一定啟動(dòng)儀器的自凈程序。 
　　浮游菌、沉降菌的采樣方法及注意事項(xiàng)同懸浮粒子， 分別通過浮游菌采樣儀及帶有微生物培養(yǎng)基的平皿來完成。培養(yǎng)皿在用于檢測時(shí)， 為避免培養(yǎng)皿運(yùn)輸或搬運(yùn)過程造成的影響， 宜同時(shí)進(jìn)行陰性對照試驗(yàn)， 每次或每個(gè)區(qū)域取1個(gè)對照皿， 與采樣皿同法操作但不需暴露采樣， 然后與采樣后的培養(yǎng)皿一起放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)， 結(jié)果應(yīng)無菌落生長。 
　　至于以上指標(biāo)的監(jiān)測頻率除沉降菌外使用者可以自己把握， 潔凈室啟用之初應(yīng)每周監(jiān)測， 如果數(shù)據(jù)穩(wěn)定， 適當(dāng)延長周期， 但建議至少每3個(gè)月監(jiān)測1次。每次實(shí)驗(yàn)時(shí)超凈臺(tái)及潔凈室內(nèi)都應(yīng)當(dāng)放置沉降菌平板， 相當(dāng)于一個(gè)實(shí)驗(yàn)環(huán)境的陰性對照， 而對于微生物實(shí)驗(yàn)， 尤其是細(xì)菌總數(shù)， 只有在監(jiān)測數(shù)據(jù)符合對應(yīng)等級的潔凈室要求時(shí)數(shù)據(jù)才有效。 
　　4 使用潔凈室的注意事項(xiàng) 
　　嚴(yán)格控制進(jìn)出潔凈室的人員， 最好門徑管理， 只有有實(shí)驗(yàn)需求的師生方可進(jìn)入， 謝絕一切不必要的參觀。進(jìn)出實(shí)驗(yàn)室嚴(yán)格按照設(shè)計(jì)路徑。 
　　使用潔凈室之前先打開凈化空氣調(diào)節(jié)系統(tǒng)和紫外燈， 至少運(yùn)行30 min；實(shí)驗(yàn)相關(guān)物品經(jīng)傳遞窗紫外燈照射30 min后進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室， 物品準(zhǔn)備齊全， 避免實(shí)驗(yàn)過程中反復(fù)進(jìn)出實(shí)驗(yàn)室增加污染幾率；進(jìn)入潔凈室必須換鞋、更衣、帶好口罩帽子， 帽子必須將頭發(fā)全部遮住， 然后風(fēng)淋進(jìn)入緩沖區(qū)， 最后進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室。值得一提的是， 使用者如果患有呼吸道疾病或皮膚疾病盡量不要進(jìn)入潔凈室， 以免影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。 
　　實(shí)驗(yàn)過程中嚴(yán)格無菌操作， 避免喧嘩、吵鬧， 更不能飲水， 吃東西， 與實(shí)驗(yàn)不相關(guān)的東西不得帶入實(shí)驗(yàn)室。 
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)束徹底清潔消毒， 紫外燈消毒30 mim。師生們需要注意的是紫外燈使用是有壽命的， 做好紫外燈使用記錄， 如果有紫外燈強(qiáng)度計(jì)日常監(jiān)測那就更好了。 
　　5 討論 
　　不管是科研還是教學(xué)， 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的真實(shí)性一直是我們不懈追求的目標(biāo)。在潔凈室完成的生物實(shí)驗(yàn)一旦污染自然前功盡棄， 對于微生物實(shí)驗(yàn)來說， 還可能造成嚴(yán)重的結(jié)果偏離， 影響教學(xué)科研質(zhì)量， 更讓很多老師及在校研究生的辛勤勞動(dòng)付之東流。 
　　工作中發(fā)現(xiàn)高校師生使用潔凈室時(shí)主要存在的不足是：使用不規(guī)范， 維護(hù)不重視， 日常不監(jiān)測。雖然大部分師生在實(shí)驗(yàn)中很注意無菌操作， 但由于忽視了實(shí)驗(yàn)操作所在的大環(huán)境， 實(shí)驗(yàn)污染的情況還是時(shí)有發(fā)生。所以醫(yī)學(xué)院校的師生還是很有必要進(jìn)行潔凈室概念、要求、監(jiān)測方法、使用注意事項(xiàng)的宣傳， 建議建立使用潔凈室的標(biāo)準(zhǔn)作業(yè)指導(dǎo)書， 潔凈室專人管理， 配備溫濕度儀、微壓計(jì)、風(fēng)速儀、微粒計(jì)數(shù)儀、浮游菌采樣儀、紫外燈強(qiáng)度計(jì)、微生物培養(yǎng)箱等必要的監(jiān)測儀器， 數(shù)據(jù)有問題時(shí)及時(shí)報(bào)修， 必要時(shí)暫停使用， 保證師生在一個(gè)安全有效的實(shí)驗(yàn)環(huán)境下開展教學(xué)科研工作。